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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- 聯(lián)系人：
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- 地址：
- 上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
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- 網(wǎng)址：
- www.bhsy-e.com/
| 參考價 | 面議 |
- 型號
- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間：2023-09-21 09:53:08瀏覽次數(shù)：188
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商品屬性：
產(chǎn)品名稱：大鼠外周血淋巴細胞
貨號：BJ-X97721
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：原代細胞
商品介紹：
名稱 大鼠外周血淋巴細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠外周血淋巴細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細胞（lymphocyte）是白細胞的一種，是體積小的白細胞。其由淋巴器官產(chǎn)生，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中，是機體免疫應(yīng)答功能的重要細胞成分，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者，是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細胞變異的一線“士兵"。淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞系，按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T淋巴細胞（又名T細胞）、B淋巴細胞（又名B細胞）和自然殺傷（NK）細胞。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞，它們的初來源是相同的，都來自造血組織。T淋巴細胞隨血循環(huán)到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B細胞在骨髓中分化成熟。當(dāng)受抗原刺激后，T淋巴細胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞，再分化為致敏T淋巴細胞，參與細胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細胞與異體細胞等；而B淋巴細胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細胞，再分化為漿細胞，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體），參與體液免疫，其功能是產(chǎn)生抗體，提呈抗原，以及分泌細胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié)；NK細胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細胞毒效應(yīng)，具有殺傷靶細胞的作用。 5.方法簡介： 公司實驗室分離的大鼠外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 公司實驗室分離的大鼠外周血淋巴細胞經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 懸浮 細胞形態(tài) 圓形 傳代特性 不增殖；不傳代 消化液 0.25% 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
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