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生物膜干涉技術(shù)(BLI)實(shí)驗(yàn)原理及操作流程

2021-12-15  閱讀(6996)

生物膜干涉技術(shù)

Octet平臺(tái)是基于生物膜干涉技術(shù)(Bio-Layer Interferometry,BLI)對(duì)生物分子相互作用進(jìn)行檢測(cè)分析,可用于測(cè)量蛋白質(zhì)與生物分子之間的相互作用。該系統(tǒng)只需微量樣本,無(wú)需標(biāo)記,可提供生物分子相互作用的實(shí)時(shí)分析結(jié)果,能夠加快和簡(jiǎn)化科研與流程。
實(shí)驗(yàn)原理
生物膜干涉技術(shù)(BLI)即一種通過(guò)檢測(cè)干涉光譜的位移變化來(lái)檢測(cè)傳感器表面反應(yīng)的技術(shù);當(dāng)一束可見(jiàn)光從光譜儀射出后,在傳感器末端的光學(xué)膜層的兩個(gè)界面會(huì)形成兩束反射光譜,并形成一束干涉光譜。任何由于分子結(jié)合或解離而形成的膜層厚度和密度變化,能夠通過(guò)干涉光譜的位移值而體現(xiàn),并通過(guò)這個(gè)位移值做出實(shí)時(shí)的反應(yīng)監(jiān)測(cè)圖譜。
操作流程:
利用Octet平臺(tái)可以實(shí)現(xiàn)分子間相互作用的定性定量分析或?qū)Φ鞍谆旌衔锓N的樣品濃度進(jìn)行定量測(cè)定。
●對(duì)蛋白質(zhì)相互作用進(jìn)行定性定量分析,每一步操作都可以得到相應(yīng)的曲線
●對(duì)蛋白質(zhì)混合物中樣品濃度進(jìn)行定量測(cè)定,儀器先對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行測(cè)定并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,再接著對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行測(cè)定,并將得到的數(shù)據(jù)插入標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可準(zhǔn)確得到樣品濃度。





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