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微生物實(shí)驗(yàn)間歇滅菌具體過程

2021-11-8  閱讀(1115)

微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等,必須經(jīng)滅菌后方能使用。

下面介紹間歇滅菌具體過程:
1、滅菌方法系利用不加壓力的蒸氣滅菌,某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸氣滅菌容易破壞,可用此法滅菌。
(1)將欲滅菌物品置于鍋內(nèi),蓋上頂蓋,打開排水口,使器內(nèi)余水排盡。
(2)關(guān)閉排水口,打開進(jìn)氣門,根據(jù)需要消毒10~20min。
(3)滅菌完畢關(guān)閉進(jìn)氣門,取出物品待冷至室溫溫度,放入37℃溫箱過夜,次日仍按上述方法消毒,如此三次,即可達(dá)到滅菌目的。

2、血清凝固器使用方法,培養(yǎng)基中含有血清或雞蛋特殊成份時,因高熱會破壞其營養(yǎng)成份,故用低溫,可使血清凝固,又可達(dá)到滅菌目的。
(1)在使用該法滅菌的血清等分裝時,需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,試管、平皿也經(jīng)滅菌后使用。
(2)將培養(yǎng)基按要求使成斜面或高層,加足水后,接上電源,升溫75~90℃1h滅菌,放37℃溫箱過夜,再如此滅菌三次。

3、煮沸消毒:可用煮鍋或煮沸消毒器,水沸騰后再煮5~15min,也可在水中加入2%石炭酸煮沸5min,加入0.02%甲醛,80℃煮60min均可達(dá)到滅菌目的,但選用煮沸消毒的增消劑時,應(yīng)注意對物品的腐蝕性。

4、滅菌處理:滅菌后物品,按正常情況已屬無菌,從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查放置,以免再度污染。
(1)物品取出,隨即檢查包裝的完整性,若有破壞或棉塞脫掉,不可作為無菌物品使用。
(2)取出的物品,如為包裝有明顯的水浸者,不可作為無菌物品使用。
(3)培養(yǎng)基或試劑等,應(yīng)檢查是否符合達(dá)到滅菌后的色澤或狀態(tài),未達(dá)到者應(yīng)廢棄。
(4)啟閉式容器,在取出時應(yīng)將篩孔關(guān)閉。
(5)取出的物品掉落在地或誤放不潔這處,或沾有水液,均視為受到污染,不可作為無菌物品使用。
(6)取出的合格滅菌物品,應(yīng)存放于貯藏室或防塵柜內(nèi),嚴(yán)禁與未滅菌物品混放。
(7)凡屬合格物品,應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限。
(8)每批滅菌處理完成后,記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時間、操作者。



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