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上海邦景實業(yè)有限公司
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其實生化試劑標本要求方法
2021-5-11 閱讀(1446)
其實生化試劑注意事項：
1、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的，所以先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的件事，否則后面的實驗結果無從談起。
2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內。
3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線的樣品數(shù)般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關系數(shù)因實驗要求不同而有所變動，但般來說，相關系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999。
其實生化試劑標本要求:
1. 血清：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2. 血漿：根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3. 尿液：無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后份待檢測，其余冷凍備用。標本的保存
般說來，在 5 天內測定的標本可放置于 4℃，超過周測定的需低溫凍存。 對收集后當天進行檢測的標本，儲存在 4 ℃ 備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復凍融。標本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時， -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度可保存 6 個月。部分標 本也可加入適當防腐劑，激素類標本需添加。
