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上海邦景實業(yè)有限公司
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兔瘟 RT-PCR 檢測試劑盒注意事項幾點
2021-3-23 閱讀(185)
兔瘟 RT-PCR 檢測試劑盒原理
提取樣品 RNA，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以RNA 為模板，以引物為起點合成與 RNA 模板互補的 cDNA 鏈。在 TaqDNA 聚合酶的作用下，經(jīng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán)，使特異DN段的拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過多次循環(huán)，*終使擴增DN段放大了數(shù)百萬倍。將擴增DN段進行電泳，經(jīng)染色后，在紫外燈照射下，肉眼可見到 DN段的擴增帶。
兔瘟 RT-PCR 檢測試劑盒注意事項
1． 建議與世亨提供的柱式 RNA 核酸提取試劑盒（含電泳試劑）配套使用。
2． 實驗過程中進行陰性對照和陽性對照樣品的質(zhì)量控制，需進行提取，建議提取用量分別100µL。
3． 所有接觸病料的物品均應(yīng)合理處置，以免污染實驗室。
4． PCR 整個試驗分配液區(qū)、模板提取區(qū)、擴增區(qū)、電泳區(qū)。流程順序為配液區(qū)→模板提取區(qū)→擴區(qū)→電泳區(qū)。嚴禁器材和試劑倒流。
5． 所有試劑應(yīng)在規(guī)定的溫度儲存。-20℃保存的各試劑管使用前應(yīng)*融化，8000rpm 離心15s，使液體全部沉于管底，放于冰盒中，吸取液體時移液器吸頭盡量在液體表面層吸取，使用后立即放回-20℃。
6． 注意防止試劑盒組分受污染。不要使用超過有效期限的試劑，試劑盒之間的成分不要混用。
7． 嚴格遵守操作說明可以獲得的結(jié)果。操作過程中移液、定時等全部過程必須精確。
8． 反應(yīng)體系應(yīng)在特定配液區(qū)或者超凈工作臺中配制，整個實驗過程嚴格控制污染。
9． 反復(fù)凍融試劑將減低檢測靈敏度，本試劑盒應(yīng)在 3 次內(nèi)用完。
