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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7說(shuō)明書(shū)
2019-9-27 閱讀(288)
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7說(shuō)明書(shū)
雖然寒霜降臨,可青松爺爺還穿著碧綠碧綠的長(zhǎng)袍,顯得更加蒼翠?;▓@里,菊花爭(zhēng)芳斗艷,紅的如火,粉的似霞,白的像雪,美不勝收。柿子樹(shù)上的葉子全都落了,可黃澄澄的柿子還掛在枝頭,像一個(gè)個(gè)大大小小的橘黃燈籠,紅彤彤的海棠樹(shù)把樹(shù)枝都?jí)簭澚?。接下?lái)介紹雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7說(shuō)明書(shū)
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7說(shuō)明書(shū)細(xì)胞傳代培養(yǎng)
操作步驟
1、將長(zhǎng)滿細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中原來(lái)的培養(yǎng)液棄去。
2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。
3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細(xì)胞。隨著時(shí)間的推移,原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時(shí)將棄去,加入10ml培養(yǎng)液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼,當(dāng)見(jiàn)到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細(xì)針孔空隙時(shí)終止消化。一般室溫消化時(shí)間約為1—3分鐘。
4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液,分到另外兩到三瓶中,實(shí)踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。 附:消化液配制方法: 稱取0.25克蛋白酶(活力為1:250),加入100ml無(wú)Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過(guò)濾除菌,4℃保存,用前可在37℃下回溫。