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大鼠肝細(xì)胞瘤的實驗步驟

2018-12-20  閱讀(442)

大鼠肝細(xì)胞瘤  實驗步驟:


1 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。


2 分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。


3 每天觀測細(xì)胞毒性指標(biāo),如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。


4 確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2-3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2-3代。


5 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。


6 重復(fù)步驟4。


7 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4-6代,確定污染是否以已被消除。



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