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抗體穩(wěn)定性檢測(cè)的方法有什么?

2025-5-19  閱讀(18)

  抗體應(yīng)該是蛋白中屬于比較穩(wěn)定的,其Tm值基本上在70度左右。但是這只是跟其它的蛋白相比,作為生物大分子蛋白的本身屬性,抗體還是存在不穩(wěn)定性,會(huì)失活降解。目前抗體在研發(fā)以及醫(yī)療領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,如若其活性變化將造成不可預(yù)知的后果,因此完善的抗體穩(wěn)定性的檢測(cè)方法是目前抗體市場(chǎng)bu可或缺,通過(guò)檢測(cè)確定其可用的條件以及有效期限。
 
  檢測(cè)抗體穩(wěn)定性的方法主要包括:
 
  1. 長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)(Real time):將抗體存放在實(shí)際保存溫度下,在不同的時(shí)間點(diǎn)取出后檢測(cè)其活性、純度、濃度等特性,直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性。此期限則為其有效的使用和保存期限。
 
  2. 加速穩(wěn)定實(shí)驗(yàn):將抗體放入高溫存儲(chǔ)條件,如室溫、37℃等,在不同的時(shí)間點(diǎn)取出后檢測(cè)其特性。根據(jù)其在高溫下失活的期限推算在實(shí)際存放條件下的保存和使用期限。
 
  3. 反復(fù)凍融:通過(guò)反復(fù)凍融來(lái)檢測(cè)抗體的穩(wěn)定性,每次凍融后檢測(cè)抗體特性,直至抗體不再具有相應(yīng)產(chǎn)品特性。
 
  4. 運(yùn)輸條件模擬:測(cè)試抗體在模擬運(yùn)輸過(guò)程中的穩(wěn)定性。1
 
  此外,抗體的穩(wěn)定性還與其濃度、保存方法和溶液體系有關(guān)。抗體在1-10mg/mL濃度范圍內(nèi)比較穩(wěn)定,應(yīng)選擇低吸附材料的包裝管,并避免反復(fù)凍融。不同溶液體系如PBS、Tris、Hepes等可能影響抗體穩(wěn)定性,有時(shí)會(huì)加入保護(hù)劑如疊氮鈉、BSA、蔗糖、海藻糖來(lái)提高穩(wěn)定性。
 


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