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上海邦景實業(yè)有限公司
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單克隆抗體的制備及應(yīng)用范圍
2024-1-29 閱讀(100)
單克隆抗體是僅與目標(biāo)蛋白某一特定表位結(jié)合的單一抗體。
單克隆抗體的制備：
簡單來說就是將免疫原注射到宿主動物體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，之后把 B 細(xì)胞從脾臟中移出，單種 B 細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合為 B 細(xì)胞雜交瘤，成為一個永生化胞株。這樣一來，雜交瘤的 B 細(xì)胞就會一直產(chǎn)出只識別單一表位的單克隆抗體，通常這個胞株會有一個特定的克隆號（clone number），用來與其他胞株區(qū)分。雜交瘤接下來可以被注射到小鼠的腹腔中大量生產(chǎn)，雜交瘤分泌富含抗體的一種液體，被稱作腹水，用注射器抽取純化，就可獲得大量的單克隆抗體。
單克隆抗體更適用于:
1、檢測單一抗原
2、檢測蛋白質(zhì)家族的單一成員
3、不同實驗/批次的抗體檢測結(jié)果穩(wěn)定一致
4、細(xì)胞染色背景較低-很適用于 IHC、ICC、IF 等應(yīng)用
5、量化蛋白質(zhì)表達 (例：流式或熒光細(xì)胞分選)
6、探測分子結(jié)構(gòu)變化
7、探測磷酸化狀態(tài)的變化
8、為 X 射線晶體測試探測目標(biāo)
9、制作缺少特定細(xì)胞類型的動物模型
10、免疫治療
單克隆抗體不建議用于:
1、根據(jù)同源性檢測不同物種的目標(biāo)蛋白；
2、檢測濃度較低的目標(biāo)蛋白；
3、檢測形態(tài)變化了的蛋白。
