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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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PCR反應(yīng)技術(shù)特點(diǎn)
2022-11-23 閱讀(315)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一項(xiàng)利用 DNA 雙鏈復(fù)制原理，在生物體外復(fù)制特定 DNA 片段的的核酸合成技術(shù)?？稍诙虝r(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的 DNA 片段，而不必依賴大腸桿菌或酵母菌等生物體。
1、靈敏度高
PCR 產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克（pg = 10-12）量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克（μg=-6）水平。能從 100 萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR 的靈敏度可達(dá) 3 個(gè) RFU（空斑形成單位）；在細(xì)菌學(xué)中最小檢出率為 3 個(gè)細(xì)菌。
2、特異性強(qiáng)
PCR 反應(yīng)的特異性決定因素：
引物與模板 DNA 特異正確的結(jié)合；
堿基配對(duì)原則；
Taq 聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
靶基因的特異性與保守性。
3、簡(jiǎn)便、快速
只需要一次性將反應(yīng)液加好后，就可以進(jìn)行擴(kuò)增。一般 2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
4、純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及 RNA 均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗漱液、毛發(fā)、細(xì)胞、活組織等 DNA 擴(kuò)增檢測(cè)。
