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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中pH值下降解決方法
2022-8-15 閱讀(330)
大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH為7.0~7.4，偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同，原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受力差，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中pH值下降產(chǎn)生的原因有很多。在細(xì)胞生長(zhǎng)非?？鞎r(shí)，pH值通常下降得很快，此時(shí)可以通過(guò)及時(shí)傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外，培養(yǎng)瓶蓋擰得過(guò)緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。這時(shí)，可以通過(guò)以下幾種方法解決：
1、增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度。NaHCO3含量在2.0 g/L到3.7 g/L之間時(shí)對(duì)應(yīng)的CO2濃度為5~10%；
2、 改用不依賴CO2培養(yǎng)液；
3、 適當(dāng)松開(kāi)瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液，使終濃度為10~25 mM；
4、在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle's鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks'鹽配制的培養(yǎng)液；
5、 如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
