科研細胞實驗技術服務外包原代細胞分離

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更新時間：2018-08-28 15:58:55瀏覽次數(shù)：2408次

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河南效勝實業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

河南專業(yè)科研細胞實驗技術服務外包原代細胞分離-效勝實業(yè)

詳細介紹

效勝實業(yè)河南專業(yè)科研細胞實驗外包細胞培養(yǎng)、原代細胞分離本公司開展了HE染色，massson染色，PAS染色等染色，免疫組化，免疫熒光，WB .PCR.透射電鏡，掃描電鏡，細胞培養(yǎng)等實驗服務，*，周期短；
一、細胞培養(yǎng)
1取材在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經(jīng)過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養(yǎng)器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的*培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。2培養(yǎng) 將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。3凍存及復蘇（可參閱后面有關章節(jié)）為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑（一般為二甲亞砜或甘油）的培養(yǎng)基，以一定的冷卻速度凍存，終保存于液氮中。在極低的溫度下，細胞保存的時間幾乎是無限的。復蘇一般采用快融方法，即從液氮中取出凍存管后，立即放入37℃水中，使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進行培養(yǎng)。

二、原代細胞分離
凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細胞稱之為原代細胞。1懸浮細胞的分離方法組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。2實體組織材料的分離方法對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
三、細胞增殖檢測技術
目前主要有兩種用于檢測細胞增殖能力的方法。一種是直接的方法，通過直接測定進行分裂
的細胞數(shù)來評價細胞的增殖能力。另一種是間接的方法，即細胞活力（cell viability）檢測方法，通過檢測樣品中健康細胞的數(shù)目來評價細胞的增殖能力。顯然，細胞活力檢測法并不能終證明檢測樣品中的細胞是否在增殖。如細胞在某一培養(yǎng)條件下會自發(fā)啟動凋亡程序，但藥物的干擾可抑制凋亡的發(fā)生；這時若采用細胞活力檢測法，顯然可以區(qū)分兩種條件下的細胞數(shù)量，但我們并不能從藥物干擾組細胞數(shù)大于對照組的事實說明藥物可促進細胞增殖的結論。所以直接的證據(jù)應該采用方法一。
其中常見檢測：CCK8檢測法，MTT檢測法，Brdu檢測法，Edu檢測法，平板克隆形成。
四、細胞周期檢測技術
細胞周期指由細胞分裂結束到下一次細胞分裂結束所經(jīng)歷的過程，所需的時間叫細胞周期時間。
常用的方法：流式檢測細胞周期，標記有絲分裂百分率法。
五、細胞凋亡檢測
常見檢測方法：流式檢測細胞凋亡，線粒體膜電位，活性氧檢測，Hoechst染色，電鏡，TUNEL。
六、細胞轉(zhuǎn)移能力檢測
常見檢測方法：細胞劃痕實驗，Transwell實驗，Invasion實驗
七、其他實驗
細胞惡性程度：軟瓊脂實驗
細胞屏障：跨膜電阻、熒光黃透過率
細胞粘附實驗
共培養(yǎng)實驗
裸鼠成瘤實驗