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甲芐喹啉和癸氧喹酯同屬于喹啉類抗球蟲藥物，用于預防及治療球蟲病。這類抗球蟲藥具有毒性低、耐受性好、代謝快的優(yōu)點，應用非常廣泛。甲芐喹啉的抗球蟲效力較強，是癸氧喹酯的兩倍。癸氧喹酯是全球一被日本、歐盟、美國和中國政府批準使用的化學型抗球蟲藥，與目前中國允許使用的獸藥飼料添加劑無任何配伍禁忌。盡管這類抗球蟲藥物的毒性較低，但抗球蟲藥物的使用易導致球蟲出現(xiàn)抗藥性，并且畜牧生產(chǎn)中使用抗球蟲藥物有加大劑量的傾向。為保障動物源性食品的安全，我國農業(yè)農村部和國家市場監(jiān)督管理總局2019年發(fā)布的GB 31650-2019《食品安全國家標準食品中獸藥最大殘留*》中明確規(guī)定了癸氧喹酯在雞靶組織中的殘留*。
本文闡述了如何將甲芐喹啉和癸氧喹酯從樣品基質中分離提取出來，并經(jīng)過凈化后，轉化成液質聯(lián)用儀可以檢測的形式。以提取、凈化為重點，依據(jù)行標SN/T 2444-2010，為檢測人員和相關領域研究人員提供一定的參考。
檢測項目：甲芐喹啉、癸氧喹酯
應用范圍：雞肉、雞肝、雞腎、雞蛋、牛肝和牛奶
前處理儀器：
固相萃取裝置；氮吹濃縮儀；均質器；旋渦混勻器；離心機（5000 r/min以上）；分析天平（感量0.1 mg和0.01 g）；移液器（10 μL～100 μL和100 μL～1000 μL）；聚丙烯離心管（50 mL和15 mL，帶螺旋蓋）；容量瓶（100 mL和1000 mL）；往復式振蕩器。
檢測儀器：LC-MS/MS+ESI源
從所取全部樣品中取出有代表性樣品可食部分約500 g，充分搗碎均勻，均分成兩份，分別裝入潔凈容器中，密封，并標明標記，于零下18 ℃ 以下冷凍存放。
從所取全部樣品中取出有代表性樣品約500 g，均分成兩份，分別裝入潔凈容器中，密封，并標明標記，于4 ℃ 冷藏存放。
制樣要求：在制樣的操作過程中，應防止樣品污染。
稱取樣品5 g（精確至0.01 g）于50 mL具塞離心管中，加入15 mL乙腈，旋渦混勻1 min，在往復式振蕩器上振蕩提取5 min，3000 r/min離心5 min，將上清液轉移至另一50 mL離心管中。在殘渣中加入10 mL乙腈，重復提取一次，5000 r/min離心5 min，合并乙腈層。在乙腈提取液中加入過量氯化鈉，旋渦混勻1 min，5000 r/min離心3 min。取上層乙腈層5 mL于15 mL離心管中，45 ℃水浴下吹氮濃縮至3 mL，加水定容至10 mL，待凈化。
將待凈化液轉入HLB固相萃取柱（60 mg，3 mL使用前依次用5 mL甲醇和5 mL水活化），以約3 mL/min的流速使樣液全部通過固相萃取柱，棄去流出液。再分別用3 mL 30 %乙腈水溶液，3 mL水淋洗，棄去流出液，用真空泵抽干固相萃取柱15 min。用3 mL乙腈洗脫被測物于15 mL離心管中，45 ℃水浴下吹氮濃縮至近干，用樣品定容溶液（乙腈+水1+1加0.1 %甲酸）溶解并定容至1.0 mL，旋渦混勻后過0.2 μm濾膜，用液相色譜-質譜/質譜儀測定。
國標解讀及注意事項
1.甲芐喹啉標準物質用N,N-二甲基甲酰胺配成100 mg/L的標準儲備液，在零下18 ℃以下避光保存；癸氧喹酯標準物質用三氯（甲）甲烷配成100 mg/L的標準儲備液，在零下18 ℃以下避光保存。
6.本方法使用基質加標流程曲線進行定量，還可以使用癸氧喹酯相對應的同位素內標配制標準曲線。
SN/T 2444-2010進出口動物源食品中甲芐喹啉和癸氧喹酯殘留量的測定 液相色譜-質譜/質譜法
圖1雞肉、雞肝、雞腎、雞蛋、牛肝和牛奶中甲芐喹啉和癸氧喹酯殘留量測定的前處理流程圖
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