填入法 DNA 末端標記試劑盒 B5次價格詳細介紹:
填入法 DNA 末端標記試劑盒 B5次價格操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
試劑的取用規(guī)則:
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實驗條件,*的設(shè)備,高素質(zhì)的實驗人員,保證您的實驗得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務(wù),您可以全稱參與了解實驗進程。
重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽) EFNB2 Protein Canine
重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 EFNB2 Protein Human
重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽) EFNB2 Protein Canine
重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽) EFNA5 Protein Canine
重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標簽) EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish)
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重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標簽) EFNB3 Protein Rat
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重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽) EFNA5 Protein Cynomolgus
重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽) EFNA1 Protein Rat
重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽) EFNB1 Protein Rat
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重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 EFNA2 Protein Mouse
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