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上海莼試生物技術(shù)有限公司

組織細(xì)胞色素ELISA試劑盒樣品準(zhǔn)備

時間:2019-11-6閱讀:238
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組織細(xì)胞色素ELISA試劑盒樣品準(zhǔn)備

1.手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定500毫克組織重量(實驗前使動物空腹12至24小時) 

2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管

3.(選擇步驟)加入xx毫升清理液(Reagent A)清洗1次

4.移入一個液氮凍存管

5.即刻放進(jìn)液氮罐過夜

6.次日從液氮罐里取出,即刻(快速度)碾碎組織成粉末(注意:切莫使組織凍融)

7.放進(jìn)一個15毫升錐形離心管

8.加入xx毫升預(yù)冷的裂解液(Reagent B)

9.渦旋震蕩5秒,充分混勻

10.即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器

11.在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約40下)

12.將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管

13.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心30分鐘,速度為9000g

14.移取上清液到2個新的1.5毫升離心管

15.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心60分鐘,速度為100000g

16.小心抽去上清液

17.分別加入xx微升裂解液(Reagent B)

18.合并到1個1.5毫升離心管

19.移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(注意:建議使用 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-30030.1)

20.即刻放進(jìn)-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作

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