小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA測(cè)定試劑盒廠家
產(chǎn)品規(guī)格：48孔（T）/96孔（T）
品牌：仁捷生物
代測(cè)服務(wù):全程ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)（從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過(guò)程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。）
特點(diǎn)：重復(fù)性好、靈敏性高、特異性強(qiáng)
運(yùn)輸：快遞（生物干冰或冰袋運(yùn)輸）2-3天。

我司ELISA試劑盒檢測(cè)樣本齊全：(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)用于測(cè)定血清，血漿，組織及相關(guān)液體等樣本。

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA測(cè)定試劑盒廠家操作注意事項(xiàng):
1）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2）實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6）洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8）加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9）按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA測(cè)定試劑盒廠家上海仁捷生物科技有限公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)ELISA檢測(cè)試劑盒，優(yōu)勢(shì)如下：  

（1）*抗體——高效、靈敏、特異  

（2）規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高  

（3）*的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)  

（4）適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。

（5）可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等X

我司ELISA試劑盒樣本處理方法匯總表及計(jì)算解析：

一、液體樣本
液體樣本處理原則：所有的液體樣本，用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），如果以后碰到其他的液體樣本，也按這個(gè)方法，納入?yún)R總表。
1、血清：用無(wú)菌管收集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、*或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3、尿液：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
4、胸腹水：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5、腦脊液：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6、唾液：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
8、牛奶：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
9、蜂蜜：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
10、全血：用含有抗凝劑的無(wú)菌管收集，立即輕輕搖動(dòng)，來(lái)回輕輕顛倒數(shù)次，使血液和抗凝劑混勻，以防血液凝固。 

二、固體樣本
 固體樣本處理原則：稱取1g的固體樣本，用9g的合適緩沖液溶解，分泌蛋白可以直接離心取上清檢測(cè)，細(xì)胞內(nèi)的蛋白，要先收集細(xì)胞，再用合適方法破碎，離心取上清測(cè)試。
1、組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取1g組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè)，其余冷凍備用，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。對(duì)于植物組織，不好勻漿的話，就在液氮中充分研磨；

2、細(xì)胞內(nèi)蛋白樣本
許多待測(cè)蛋白不是分泌蛋白，而是存在于細(xì)胞內(nèi)的蛋白，這個(gè)時(shí)候，要先收集細(xì)胞，洗滌干凈，再破碎細(xì)胞，離心取上清。
（1）培養(yǎng)的細(xì)胞
A、動(dòng)物細(xì)胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液，使細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融（如果反復(fù)凍融，破碎效果不好，就采用超聲波破碎），以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
B、植物細(xì)胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液，使細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右，置于冰盒上，用超聲破碎儀，設(shè)置破碎2s，冷卻30s的方式，充分破碎細(xì)胞，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）組織的細(xì)胞
切割標(biāo)本后，稱取1g組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），去除上清，再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細(xì)胞三遍。再用上述的細(xì)胞破碎方法破碎細(xì)胞。
3、土壤：稱取1g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工將標(biāo)本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè)，其余冷凍備用，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。如果是測(cè)分泌蛋白，直接取上清檢測(cè)，測(cè)試細(xì)胞內(nèi)蛋白，要破碎細(xì)胞。
4、*：加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS，溶解*頭部，搖勻，用鑷子取出*并擠干液體，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測(cè)，其余冷凍備用，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。如果是測(cè)分泌蛋白，直接取上清檢測(cè)，測(cè)試細(xì)胞內(nèi)蛋白，要破碎細(xì)胞。
5.植物標(biāo)本中相關(guān)酶或蛋白的測(cè)定：（粗提取）
1、新鮮植物組織請(qǐng)?jiān)谝旱谐浞盅心ィ?br />2、加入樣品體積9倍的提取液（pH?7.4PBS緩沖液）,3、請(qǐng)于4度，8000rpm，離心30分鐘，取上清并暫時(shí)保存于4度待用。 

三、樣本收集注意事項(xiàng)
1、不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
2、標(biāo)本采集后盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、我們羅列的是通用的樣本處理方法，無(wú)法涵蓋各種樣本，對(duì)于一些特殊樣本，建議實(shí)驗(yàn)人員多參考已發(fā)表的文獻(xiàn)，自行設(shè)計(jì)合理的樣本處理方法。

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計(jì)算方法示例：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。將樣本的OD值為X值代入方程式，所得的Y值即是我們的樣本值。（如下圖所示）