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大鼠神經(jīng)型一氧化氮合酶()ELISA試劑盒的洗滌

洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中是zui多次數(shù)的操作，也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交叉污染現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)重復(fù)效果差的現(xiàn)象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管，還是洗板機(jī)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)。注意標(biāo)準(zhǔn)化操作將減少實(shí)驗(yàn)誤差和不同實(shí)驗(yàn)之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象，請(qǐng)比照操作：

a)洗液不要溢出孔外，以免污染相鄰的孔，特別是每次洗板的前兩遍，若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定會(huì)增高。

b)特別注意：設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要考慮實(shí)驗(yàn)孔的位置，保證甩掉洗液時(shí)，空白孔、低濃度孔或陰性對(duì)照組在上面或一側(cè)或分開(kāi)。同時(shí)注意甩掉洗液的動(dòng)作翻轉(zhuǎn)(從正上方旋轉(zhuǎn)120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉(zhuǎn)來(lái)甩液體!甩出后以直線方式補(bǔ)2-3次甩出液體。

c)用干凈的濾紙，不要用衛(wèi)生紙，因?yàn)榧?xì)小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底，導(dǎo)致洗板不干凈，結(jié)果偏高或偏低，重復(fù)孔的數(shù)值也會(huì)相差很大。

d)每次拍板不要重復(fù)在一個(gè)地方拍，特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過(guò)輕，否則拍不干凈，拍板很用力不會(huì)對(duì)蛋白有什么影響。但注意不要太重，以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下，zui后一次一定要扣干凈。

e)不能減少洗液體積、洗板時(shí)間和次數(shù)。洗板時(shí)間太短，洗板效果不佳。延長(zhǎng)洗板時(shí)間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。

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技術(shù)問(wèn)答：

問(wèn)：建議標(biāo)準(zhǔn)做復(fù)嗎?

答：標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔是的

問(wèn)：36個(gè)樣品，定96T的，可以測(cè)一個(gè)重復(fù)吧

答：可以

問(wèn)：Elisa方法的不測(cè)人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎?

答：Elisa不測(cè)滴度的，熒光法可以測(cè)

問(wèn)：酶標(biāo)板不平，影響結(jié)果嗎。

答：不影響結(jié)果的。