上海研盟生物科技有限公司Anti-PACAP receptor抗體*,主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中。說(shuō)明書(shū)隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取。客服:.
各種HRP酶標(biāo)記成抗體的效價(jià)測(cè)定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效價(jià)測(cè)定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C過(guò)夜;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀釋的HRP標(biāo)記抗體 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、終止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 測(cè)定OD值;
10、陽(yáng)性O(shè)D值比對(duì)照值大3倍,為判斷效價(jià)稀釋度。
腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體,Anti-PACAP receptor抗體簡(jiǎn)單介紹:
英文名稱:Anti-PACAP receptor antibody
中文名稱:腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體
產(chǎn)品別名:ADCYAP1 R1; ADCYAP1R 1; PACAP-R1; adenylate cyclase activating polypeptide 1 (pituitary) receptor type 1; PAC 1; PAC1; PAC1R; PACAP R 1; PACAP1 R; PACAPR; PACAPRI; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide 1 receptor type I Hiphop; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide receptor; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide type I receptor precursor; PACR_HUMAN.
產(chǎn)品規(guī)格:0.1ml、0.2ml、1ml
產(chǎn)品用途:科研實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品價(jià)格:請(qǐng)報(bào)價(jià)
說(shuō)明書(shū):請(qǐng)?zhí)砑涌头苯铀魅?/p>
抗體來(lái)源:該指標(biāo)有兩種產(chǎn)品,一種是兔來(lái)源抗體,一種是鼠來(lái)源抗體
克隆類型:兔來(lái)源為多克隆抗體,鼠來(lái)源單克隆抗體
交叉反應(yīng):請(qǐng)索取說(shuō)明書(shū)查看
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
亞 型:IgG
純化方法: affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
背景介紹: Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) is a neuropeptide belonging to the vasoactive intestinal polypeptide/glucagon/ secretin family. It is widely distributed in the body, and a variety of biological actions have been reported. Recent studies have shown that there is a family of PACAP receptors (PACAPRs), and two members of this family have been identified. This is a receptor for PACAP-27 and PACAP-38. The activity of this receptor is mediated by G proteins which activate adenylyl cyclase. May regulate the release of adrenocorticotropin, luteinizing hormone, growth hormone, prolactin, epinephrine, and catecholamine. May play a role in spermatogenesis and sperm motility. Causes smooth muscle relaxation and secretion in the gastrointestinal tract (By similarity). Belongs to the G-protein coupled receptor 2 family.
腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
組織固定時(shí)間和所需的抗原熱修復(fù)的關(guān)系
大量的實(shí)驗(yàn)表明,固定時(shí)間越長(zhǎng)的標(biāo)本,它所形成的橋連就越緊密,抗原就越難以被激活,所需要的修復(fù)強(qiáng)度也就越強(qiáng)。有意思的是隨著固定時(shí)間的延長(zhǎng),組織中蛋白對(duì)溫度的耐受也相應(yīng)增高,這可能就是我們對(duì)固定時(shí)間長(zhǎng)的標(biāo)本加大修復(fù)強(qiáng)度的理論基礎(chǔ)。
這就提醒我們?cè)谧龌仡櫺缘难芯繒r(shí)一定要注意所使用的修復(fù)條件,它與新鮮標(biāo)本的修復(fù)條件一定是有所區(qū)別的,同等條件下一定要加長(zhǎng)修復(fù)的時(shí)間或提高修復(fù)所使用的溫度,才可能得到比較滿意的結(jié)果。
不同pH值抗原修復(fù)液對(duì)染色結(jié)果的影響
抗原熱修復(fù)中所使用的修復(fù)液pH值也會(huì)對(duì)染色結(jié)果產(chǎn)生相當(dāng)大的影響。
pH值對(duì)染色結(jié)果的影響大概可以分為以下四種情況:
A.穩(wěn)定型,pH值對(duì)染色結(jié)果影響不大,如PCNA、AE1、EMA、CD20等;
B.V型,高pH值和低pH值染色較好,而pH值4-5染色結(jié)果較差,如ER、Ki-67等;
C.上升型,隨著pH值的增加,染色結(jié)果逐漸增強(qiáng),如HMB45等;
D.下降型,隨著pH值的增加染色結(jié)果逐漸減弱,當(dāng)然這種類型的抗體只是個(gè)別的現(xiàn)象,如MOC31。
一個(gè)有趣的現(xiàn)象值得注意,即在高pH值都有較好的染色結(jié)果,所以目前比較推崇的抗原修復(fù)液為高pH值得修復(fù)液,如1mMEDTA, pH8.0或pH9.0等。但是由于傳統(tǒng)習(xí)慣,絕大多數(shù)醫(yī)院和實(shí)驗(yàn)室都在使用pH6.0的枸櫞酸緩沖液。綜合以上各種抗體的染色狀況,考慮到臨床工作的實(shí)際情況,許多國(guó)外免疫組化專家建議,在常規(guī)的免疫組化工作中,全部選用高pH值得修復(fù)液來(lái)代替目前廣為使用的pH6.0枸櫞酸緩沖液。為此,本公司已經(jīng)推出pH8.0和pH9.0的新型抗原修復(fù)液。經(jīng)驗(yàn)證,絕大多數(shù)的抗體使用pH9.0得修復(fù)液效果都要優(yōu)于pH6.0的枸櫞酸,尤其是核陽(yáng)性的抗體。所以,在常規(guī)的免疫組化工作中,使用高pH值的抗原修復(fù)液是今后的必然趨勢(shì)。
腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體,Anti-PACAP receptor抗體部分實(shí)驗(yàn)介紹:
有關(guān)免疫組化實(shí)驗(yàn)的重要問(wèn)題
(一)組織材料處理
1.取材要取新鮮組織,大小合適,用生li鹽水洗凈
2.固定固定就是把病理標(biāo)本組織浸泡在固定液中(常用的有4%多聚甲醛),使組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質(zhì),并保持細(xì)胞原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)
3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去,以利于進(jìn)行脫水,若組織中留有較多的固定液,則將影響脫水劑,甚至可在組織中發(fā)生沉淀而影響后續(xù)染色及觀察,對(duì)于陳舊性標(biāo)本或固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的標(biāo)本,更應(yīng)注意流水沖洗。
4.脫水脫水必須*,若脫水不盡,則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮,蠟塊切面出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象,雖可勉強(qiáng)切片,但染色效果差,染色時(shí)也容易脫落
5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟,所以浸蠟之前需要一個(gè)既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑,以便使石蠟浸入到組織中去,當(dāng)組織中全部被透明劑占有時(shí),光線可以透過(guò),組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài),此現(xiàn)象稱為透明。如果組織不能透明,表明脫水未盡必須重新返工,否則影響到浸蠟的進(jìn)行,但返工時(shí)往往效果不好
6.浸蠟浸蠟時(shí)間根據(jù)組織的類型可適當(dāng)調(diào)整,一般原則較小組織脫水時(shí)間和浸蠟時(shí)間較短;骨、肌肉等堅(jiān)硬組織脫水和浸蠟時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng);脂肪組織、疏松結(jié)締組織脫水和浸蠟時(shí)間需增加
7.包埋包埋時(shí)應(yīng)注意組織的包埋方向,否則將影響組織切片的形態(tài)。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)*,包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應(yīng)呈均勻的半透明狀,如出現(xiàn)白色渾濁則其中存在石蠟的結(jié)晶,這種蠟塊不能切除薄的切片??赡苁墙M織脫水不充分,組織內(nèi)或石蠟中混有透明劑,或包埋時(shí)動(dòng)作太慢或石蠟?zāi)烫拢岳鋮s時(shí)水溫不能過(guò)高,否則就不宜迅速凝固
8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環(huán)境預(yù)冷,切出的切片連續(xù)性較好,有利于展片,一般切片厚度4-6um
(二)抗原修復(fù)
組織在制作過(guò)程中,由于固定液的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過(guò)程中不能將其顯示出來(lái),為了解決上述的問(wèn)題,利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來(lái)或修正過(guò)來(lái)的過(guò)程稱為抗原修復(fù)。
上海研盟生物科技有限公司常用的抗原修復(fù)液有:0.01M枸櫞酸(pH6.0)、0.05M EDTA(pH8.0)、0.01M TBS(pH7.4)、*、*
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