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三種方法助您評(píng)判免疫組化結(jié)果分析

2018-10-16  閱讀(4575)

免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究,稱(chēng)為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。

(1)陽(yáng)性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法。在40*光鏡下,隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野,人工或機(jī)器計(jì)數(shù)陽(yáng)性著色細(xì)胞,每組3~6張不同動(dòng)物組織切片,然后進(jìn)行組間比較即可。  
(2)灰密度分析法。通過(guò)在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析即可。  
(3)評(píng)分法。通過(guò)在光學(xué)顯微鏡下對(duì)組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色)、陽(yáng)性范圍進(jìn)行評(píng)分(1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),終可以分?jǐn)?shù)相加,再進(jìn)行比較。  
對(duì)于以上這幾種方法,各有利弊,請(qǐng)細(xì)心選擇。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質(zhì)量切片。



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