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牛血清白蛋白（BSA）制備技術(shù)簡介
2018-2-26 閱讀(3234)
牛血清白蛋白（BSA），是牛中的一種球蛋白，包含583個氨基酸殘基，分子量為 66.446kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，如在免疫分析實(shí)驗(yàn)中作為封閉劑和作為抗體保護(hù)劑。
血清BSA的制備方法主要有以下幾類：
1、冷乙醇方法：
1940年由哈附大學(xué)的Cohn的發(fā)明的，多步蒸餾法，血清蛋白可以根據(jù)控制不同的溫度和不同的乙醇濃度進(jìn)行分離。他利用兩這種不同來把血清分離成五種組分，第五部分含有zui多的白蛋白，所以叫做第五組分。冷乙醇法由于加入了有機(jī)溶劑，需要在溫度極低的情況下在血液中加入乙醇直到白蛋白析出，會有殘留溶劑造成BSA 純度不高?，F(xiàn)代工藝對Cohn冷乙醇法進(jìn)行了不斷的改進(jìn)。
2、熱休克法
heat-shock熱激包含控制溫度和過濾來分離白蛋白。現(xiàn)在傾向于在幾個關(guān)鍵步驟用熱代替有機(jī)溶劑，因?yàn)橐掖加幸讚]發(fā)和危險(xiǎn)性。熱休克法生產(chǎn)的BSA產(chǎn)量高，純度也高，逐漸取代Cohn法成為BSA分餾主要方法，但是熱休克法BSA也有一些缺陷：BSA蛋白高溫變性，活性低。
3、色譜層析法（Chromatographic）法是目前BSA生產(chǎn)*的方法，也是zui為溫和的方法；主要包括三個步驟，超濾，離子交換色譜層析和硫酸銨沉淀；整個過程，無加熱，無乙醇，無辛酸，zui大程度保護(hù)BSA自然結(jié)構(gòu)和功能，純度高，細(xì)胞培養(yǎng)。但與其他方法比成本較高。
