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ELISA夾心法應(yīng)該如何操作?

閱讀:251發(fā)布時間:2017-8-23

  ELISA夾心法應(yīng)該如何操作?在選擇抗體的時候,選擇一個單抗和一個對抗配對,若是選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體,是用同一家公司同一批次的。

ELISA夾心法應(yīng)該如何操作圖片



  一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。


  標準品的配制:對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復(fù)溶。


  ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應(yīng)包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。


  為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。


  若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。


  當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。


  我們提供專業(yè)的elisa試劑盒,5000多個種屬,種類算是比較齊全的,而且全部現(xiàn)貨供應(yīng),只要做科研實驗,立馬是可以發(fā)貨的,而且購買我們金益柏的elisa試劑盒,我們提供免費代測服務(wù),質(zhì)量保障,售后*。


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