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閱讀：1745發(fā)布時(shí)間：2017-4-20
單抗還是多抗？多肽還是重組蛋白？
我們收到這樣一個(gè)定制抗體的訂單詢問，我要定制一個(gè)針對(duì)小鼠Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)某一段序列的抗體，這段序列包含35-55位氨基酸，那么我是需要單克隆抗體好還是多克隆抗體好？制備抗體的時(shí)候是用多肽作為免疫原好還是用重組蛋白作為免疫原好呢？
首先，我們來看看單克隆抗體和多克隆抗體的主要區(qū)別在哪里呢？單克隆抗體是針對(duì)單一抗原決定簇，來自單個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆的抗體，多克隆抗體是針對(duì)多個(gè)抗原決定簇，由多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體。通常來說一個(gè)含有多個(gè)抗原決定簇的大分子免疫原進(jìn)入機(jī)體后，其不同的抗原決定簇會(huì)和帶有不同BCR的B細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，進(jìn)而使這些B細(xì)胞分化成為多種漿細(xì)胞，分泌針對(duì)不同抗原決定簇的抗體。這些抗體的集合體就是多抗，而需要得到針對(duì)單一抗原決定簇的單抗時(shí)，就需要對(duì)分泌抗體的B淋巴細(xì)胞（實(shí)際操作過程中是對(duì)融合細(xì)胞）進(jìn)行篩選，并進(jìn)行單克隆化了。
接下來我們看看實(shí)驗(yàn)需求：獲得針對(duì)35-55位氨基酸的抗體，這個(gè)小片段僅包括了21個(gè)氨基酸，依據(jù)抗原決定簇的大小，該片段內(nèi)應(yīng)該僅含有1-2個(gè)抗原決定簇，那么由此可以發(fā)現(xiàn)客戶對(duì)于抗體特異性的要求是十分高的，鑒于此，我們建議客戶制備單克隆抗體，這樣在有限稀釋單克隆篩選的過程中就可以直接篩選得到分泌針對(duì)目的片段抗體的單克隆株，從而保證特異性。
確定制備何種抗體后，我們就需要確定該用什么免疫原了。小鼠MOG蛋白是一個(gè)含有246個(gè)氨基酸的跨膜蛋白，僅從蛋白大小來分析，其至少還有10-20個(gè)抗原決定簇。姑且不論跨膜蛋白不易表達(dá)，即使我們能表達(dá)出全長(zhǎng)的蛋白，如果我們用該蛋白作為免疫原免疫動(dòng)物制備抗體，再?gòu)尼槍?duì)不同的抗原決定簇的抗體中篩選出僅針對(duì)35-55位氨基酸的抗體，那么特異性抗體篩選的工作量和實(shí)驗(yàn)用時(shí)無疑是很大的，鑒于此，可以考慮直接用多肽進(jìn)行載體偶聯(lián)后作為免疫原來制備抗體。
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