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從細(xì)胞遺傳學(xué)角度看支原體污染的影響

閱讀:382發(fā)布時(shí)間:2017-8-2

細(xì)胞培養(yǎng)不僅在許多實(shí)驗(yàn)室用于生物醫(yī)學(xué)研究,而且在工業(yè)生產(chǎn)也常用于疫苗、重組蛋白和單克隆抗體的生產(chǎn)。支原體污染常常給科研與生產(chǎn)帶來嚴(yán)重的干擾,但它早期的污染又沒有明顯的表現(xiàn),因此沒有受到重視。zui近,威正翔禹生物看到一篇論文,打算從細(xì)胞遺傳學(xué)角度看看支原體污染的影響。

這篇文章題目是《支原體污染對動(dòng)物組織培養(yǎng)中細(xì)胞特性的影響》,刊登在1996年第1期的《上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》上。作者采用的是豬腎傳代細(xì)胞系IB-RS-2細(xì)胞,這是之前常用作疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞。M199培養(yǎng)基,加小牛血清和水解乳蛋白用于該細(xì)胞的培養(yǎng)。作者用已知感染過*支原體的小牛血清來培養(yǎng)IB-RS-2細(xì)胞,把它作為天然感染組。把*支原體直接加入到培養(yǎng)液中,把它作為人工感染組,并進(jìn)行了電鏡及染色體的觀察。

結(jié)果支原體污染造成的影響有如下:

1、細(xì)胞形態(tài)的變化:主要表現(xiàn)為細(xì)胞界限模糊,胞漿顆粒增多,有的細(xì)胞甚至失去了原來的形態(tài)而發(fā)生皺縮,有的細(xì)胞從瓶壁上脫落。

2、染色體的變化:作者進(jìn)行了染色體檢查,發(fā)現(xiàn)一個(gè)核內(nèi)有多個(gè)染色單體斷裂、易位、雙著絲粒和多倍體核型,畸變率達(dá)25%。

3、pH的影響:支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物在接種后84小時(shí)后,也沒有明顯的pH變化,而無污染的對照組因細(xì)胞產(chǎn)酸而發(fā)生pH值明顯降低,從起始的pH值7.6變?yōu)?.8。

4、病毒滴度下降:作者觀察了病毒在支原體污染的細(xì)胞中增殖所受到的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),病毒滴度下降了10倍以上。

因此,早期開展支原體檢測和預(yù)防,對于保證正常的工業(yè)生產(chǎn)和科研,都是非常必要的。


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