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人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒

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更新時間:2017-10-30 12:32:31瀏覽次數(shù):398次

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人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒科研產(chǎn)品特點:

1.即用型溶液:無需混合;

2.方便快捷;反應(yīng)靈敏度高;

3.不低于A.B液;

4.背景低:底物溶液在650nm檢測時檢測OD值小于0.04;

5.產(chǎn)品批間差小。

注意:如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀,表明TMB底物反應(yīng)過于強烈,為了避免產(chǎn)生沉淀,可在終止后馬上讀數(shù)?;蛘哌M(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。

人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒操作程序:

1.將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出,置室溫(20-25 )平衡30 min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2.按需要取出微孔條及板架,將不用的微孔板重新密封,保存于2-8 ,不要冷凍。

3.加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50 μL /孔,然后加入抗體工作液50 μL /孔,再振蕩混勻,用封板膜蓋板,37 反應(yīng)30 min。

4.洗板4-5次,每次浸泡30秒,拍干。

5.加入酶標(biāo)記物100 μL /孔,用封板膜蓋板,37 反應(yīng)20 min。

6.洗板4-5次,每次浸泡30 s,拍干。

7.顯色:每孔加入底物緩沖液50 μL,再加底物液50 μL,輕輕振蕩混勻,37 環(huán)境避光顯色10 min。

8.測定:每孔加入終止液50 μL,輕輕振蕩勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450 nm處(在20 min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定吸光度值。

人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒科研檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件:

1. 加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。

2. 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

3. 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。

4. 合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

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