摘要：觀察大鼠雪旺細(xì)胞系RSC96 細(xì)胞條件培養(yǎng)液（RSC96-CM）對(duì)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞（OPCs）增殖的影響，探討其作用機(jī)制。

目的：觀察大鼠雪旺細(xì)胞系RSC96 細(xì)胞條件培養(yǎng)液（RSC96-CM）對(duì)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞（OPCs）增殖的影響，探討其作用機(jī)制。

方法：應(yīng)用免疫粘附法從胚胎15d 的SD 大鼠脊髓分離OPCs，應(yīng)用BrdU 摻入實(shí)驗(yàn)檢測(cè)OPCs的增殖，應(yīng)用RT-PCR 技術(shù)檢測(cè)PDGF-AA和bFGF 在RSC96 細(xì)胞的表達(dá)，應(yīng)用ELISA 技術(shù)檢測(cè)RSC96-CM 中PDGF-AA和bFGF 蛋白的濃度，以特異性抑制劑阻斷觀察PDGF-AA和bFGF 在RSC96-CM誘導(dǎo)OPCs 增殖中的作用，以特異性抑制劑觀察ERK和JNK信號(hào) 途徑在RSC96-CM誘導(dǎo)OPCs增殖中的作用。

結(jié)果：不同濃度的RSC96-CM培養(yǎng)的OPCs，其BrdU+細(xì)胞的比例與對(duì)照組相 比均顯著增加（P<0.05），其中，在含50% RSC96-CM 的培養(yǎng)液中培養(yǎng)的OPCs 的BrdU+細(xì)胞的比例達(dá)高峰。RT-PCR 證實(shí) RSC96 細(xì)胞顯著表達(dá)PDGF-AA和bFGF 的mRNAs，ELISA 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，RSC96-CM中PDGF-AA和bFGF 的蛋白濃度分別是 我們前期報(bào)道的B104CM中PDGF-AA和bFGF的蛋白水平的0.87 倍和0.92 倍。PDGFR的特異性抑制劑AG1295 和bFGFR 特異性抑制劑PD173074 均顯著降低RSC96-CM 誘導(dǎo)的OPCs 增殖；此外，Erk1/2 特異性抑制劑U0126 和JNK 特異性抑制 SP600125的預(yù)孵也顯著降低RSC96-CM誘導(dǎo)的BrdU+ OPCs的比例（P<0.01）。

結(jié)論：RSC96-CM顯著誘導(dǎo)OPCs的增殖，其通 過RSC96分泌的PDGF-AA和bFGF激活Erk1/2和JNK信號(hào)途徑而發(fā)揮作用；RSC96-CM也可以作為OPCs常規(guī)培養(yǎng)的擴(kuò)增劑。