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所 在 地鹽城市
更新時間:2019-04-16 09:17:46瀏覽次數(shù):823次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線大鼠15-deoxy-前列腺素15d-PGJ2ELISA試劑盒
大鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒的試劑準備:
1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
500pg/ml | (6號標準品) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul |
250pg/ml | (5號標準品) | 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
125pg/ml | (4號標準品) | 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
62.5pg/ml | (3號標準品) | 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
31.2pg/ml | (2號標準品) | 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
15.6pg/ml | (1號標準品) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
0pg/ml | (空白對照) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul |
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
大鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒的操作流程:
1.在各孔中加入標準品或樣品各100μL,37℃孵育90分鐘;
2.加入100μL 生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘;
3.洗滌3次;
4.加入100μL酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘;
5.洗滌5次;
6.加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右;
7.加入50μL終止液,立即在450nm波長處測量OD值;
8.結(jié)果計算。
大鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒的結(jié)果判斷與分析:
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的LAM標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的LAM含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
3、檢測值范圍:0-480ng/ml
4、敏感度:0.1ng/ml
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