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更新時(shí)間:2017-02-27 17:12:56瀏覽次數(shù):280次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)ELISA試劑盒
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前試劑的準(zhǔn)備:
按試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒的洗滌:
洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)??梢哉f(shuō)在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)引起操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌,不得馬虎。除ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,還有手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒不可重復(fù)用的,因?yàn)榘蹇咨系目贵w做過(guò)一次之后就已經(jīng)結(jié)合掉了,要重復(fù)做的話,肯定只能買新的試劑盒。試劑盒在大量操作的時(shí)候都是比較簡(jiǎn)單的,zui起碼在同一個(gè)人操作的時(shí)候,一般不會(huì)出現(xiàn)太大的偏差。如果是96孔板的話,96孔板的孔可以拆卸下來(lái),當(dāng)然可以這次用幾個(gè),下次用幾個(gè)的,大大提高了實(shí)驗(yàn)的效率!
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒的溫育操作:
ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育(incubation)。
ELISA試劑盒屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。溫育常采用的溫度有 43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒的免疫測(cè)定在檢驗(yàn)中的應(yīng)用:
由于各種抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體,利用此抗體作為試劑就可檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原,因此免疫測(cè)定的應(yīng)用范圍極廣,在檢驗(yàn)中可用于測(cè)定:
1)體液中的各種蛋白質(zhì),包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等。
2)激素,包括小分子量的甾體激素等。
3)抗生素和藥物。
4)病原體抗原,HBsAg、HBeAg等。
5)另外,也可利用純化的抗原檢測(cè)標(biāo)本中的抗體,例如抗-HBs等。
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鄭重聲明:小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷!
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