培養(yǎng)基的滅菌并不復(fù)雜,只需要區(qū)分培養(yǎng)基中的哪些成分是可以高溫高壓,哪些不需要.此外還需要控制溫度.

    允許高溫高壓的成分在滅菌前配置好,高溫高壓滅菌即可（絕大多數(shù)成分可以直接高溫高壓滅菌）,部分成分高溫高壓后會導(dǎo)致其失效的應(yīng)該在滅菌完成后加入,加入前可以用濾過除菌法滅菌.

    一般來說,糖發(fā)酵類和部分選擇性高的培養(yǎng)基是在115度溫度下滅菌,其他多數(shù)為121 度.選擇性非常強(qiáng)的培養(yǎng)基甚至只需要煮沸即可.

1.首先將內(nèi)層滅菌筒取出，再向外層鍋加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。

2.放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。三角瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞，

3.加蓋，將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時(shí)旋緊相對的兩個(gè)螺栓。

4.通電加熱，并同時(shí)打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣*排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升，當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力至所需時(shí)間。

5. 滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí)，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí)，打開排氣閥，就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。