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江蘇菲亞酶聯(lián)免疫試劑盒的操作步驟

時間:2016/12/16閱讀:1172
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江蘇菲亞酶聯(lián)免疫試劑盒的操作步驟
1 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目。
2 將倍比稀釋的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔加入。
3 酶標板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。
4 反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體;或甩去酶標板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5 將準備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
6 0.01M TBS0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
8 0.01M TBS0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過程中,要經(jīng)常的觀察,當(dāng)肉眼可見標準品的前3-4孔有    明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯時,即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)zui長不要超過30分鐘)。
10 用酶標儀在450nm測定O.D.值。
11 根據(jù)樣品的吸光值在坐標上找出對應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應(yīng)該×N。

    Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗分析方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素, 已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)科研實驗的各領(lǐng)域中。 本司產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于其他用途! 

 

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