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大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒中的洗滌
洗滌是ELISA實驗中是zui多次數的操作,也是非常重要的步驟。不嚴格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交叉污染現(xiàn)象,實驗重復效果差的現(xiàn)象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管,還是洗板機,嚴格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時間和洗滌次數。注意標準化操作將減少實驗誤差和不同實驗之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象,請比照操作:
a)洗液不要溢出孔外,以免污染相鄰的孔,特別是每次洗板的前兩遍,若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔,其造成的交叉污染的孔是洗不掉的,背景肯定會增高。
b)特別注意:設計實驗的時候要考慮實驗孔的位置,保證甩掉洗液時,空白孔、低濃度孔或陰性對照組在上面或一側或分開。同時注意甩掉洗液的動作翻轉(從正上方旋轉120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉來甩液體!甩出后以直線方式補2-3次甩出液體。
c)用干凈的濾紙,不要用衛(wèi)生紙,因為細小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底,導致洗板不干凈,結果偏高或偏低,重復孔的數值也會相差很大。
d)每次拍板不要重復在一個地方拍,特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕,否則拍不干凈,拍板很用力不會對蛋白有什么影響。但注意不要太重,以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下,zui后一次一定要扣干凈。
e)不能減少洗液體積、洗板時間和次數。洗板時間太短,洗板效果不佳。延長洗板時間和增加洗板次數可以使背景更干凈。
檢測范圍和保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃
2.有效期:6個月
大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒簡單介紹:
品牌:進口/國產
英文名稱:Rat Thyroxine antibody,TAb Elisa Kit
產品規(guī)格:
48T(48T檢測雙標準的可以檢測37個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。48T檢測單標準可以檢測40個樣本,其他有7個標準品孔,1個空白對照。 )
96T(96T檢測雙標準的可以檢測85個樣本,其他有10個標準品孔,1個空白對照。96T檢測單標準可以檢測90個樣,7個標準品控 1個空白對照。)
產品用途:本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中待測物質的含量。
產品特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
實驗原理:
1.本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平。用純化的待測物質抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質,再與HRP標記的待測物質抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中待測物質濃度。
2. 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被待測物質捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒應用
1.免疫酶染色各種細胞內成分的定位。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。
4.定量檢測體液中抗原或抗體成分。
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