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大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒檢測程序
1.建立標(biāo)準(zhǔn)曲線:設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔8孔,每孔中各加入樣品稀釋液100ul,*孔加標(biāo)準(zhǔn)品100ul,混勻后用加樣器吸出100ul,移至第二孔。如此反復(fù)作對倍稀釋至第六孔,zui后,從第六孔中吸出100ul棄去。第七孔為空白對照,第八孔為零孔。
2.加樣:待測品孔每孔各加入待測樣品100ul混勻。
3.將反應(yīng)板充分混勻后粘上封板紙置37 oC 120分鐘。
4.洗板:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
5.每孔(除零孔)加*抗體工作液50ul,置37℃ 60分鐘。
6.洗板:操作同4。
7.每孔(除零孔)加酶標(biāo)抗體工作液100ul(兩滴),將反應(yīng)板置37 oC 60分鐘。
8.洗板:同前。
9.每孔加入底物液A、B各一滴,置37 oC避光反應(yīng)15分鐘。
10.終止:每孔加入1滴終止液混勻。
11.測定:在450nm處測吸光值。
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒簡單介紹:
品牌:進口/國產(chǎn)
英文名稱:Rat lipoprotein lipase,LPL Elisa Kit
產(chǎn)品規(guī)格:
48T(48T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。48T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測40個樣本,其他有7個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。 )
96T(96T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個樣本,其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個空白對照。96T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測90個樣,7個標(biāo)準(zhǔn)品控 1個空白對照。)
產(chǎn)品用途:本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。
產(chǎn)品特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
實驗原理:
1.本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物質(zhì)濃度。
2. 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被待測物質(zhì)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒應(yīng)用
1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成分的定位。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4.定量檢測體液中抗原或抗體成分。
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