細(xì)胞：HIT-T15細(xì)胞
中文名稱：倉(cāng)鼠beta胰島β細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
在受精過(guò)程中, 哺乳動(dòng)物卵子細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度呈現(xiàn)連續(xù)性反復(fù)升高.
有證據(jù)表明: 將受精的1-和2-細(xì)胞期的胚胎細(xì)胞核移植到未受精卵中能導(dǎo)致卵子產(chǎn)生鈣升高并使該重構(gòu)胚激活.
(人 Caco-2細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)(人 Ca Ski細(xì)胞 癌細(xì)胞)
然而, 尚不清楚胚胎細(xì)胞核這種誘導(dǎo)卵子內(nèi)鈣升高的能力是如何獲得的, 是否處于不同發(fā)育階段的早期胚胎細(xì)胞核都具有這種能力. (人 D341 Med細(xì)胞 髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)(人 DMF7細(xì)胞 腎細(xì)胞)
利用細(xì)胞核移植技術(shù), 將小鼠受精早期胚胎細(xì)胞核移植到成熟卵母細(xì)胞中, 并測(cè)定該重構(gòu)胚細(xì)胞內(nèi)鈣含量變化
(人 HCT-8細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)(人 HEC-1-B細(xì)胞 子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)
結(jié)果表明:受精1-和2-細(xì)胞期的細(xì)胞核具有誘導(dǎo)成熟卵子鈣釋放活性的功能, 而4-和8-細(xì)胞期細(xì)胞核、融合的2或3個(gè)4-細(xì)胞期的細(xì)胞核及乙醇孤雌活化的原核均不具有這種能力.
(小鼠 Hepa 1-6細(xì)胞 肝癌細(xì)胞)(人 CCC-HPF-1細(xì)胞 胚肺成纖維細(xì)胞)
結(jié)果說(shuō)明:胚胎細(xì)胞核誘導(dǎo)卵子細(xì)胞內(nèi)鈣升高的能力是受精過(guò)程中產(chǎn)生的, 是受精胚特_有的, 它存在于早期受精胚的特殊發(fā)育階段. 這暗示早期受精胚這一特_有的能力對(duì)胚胎的正常發(fā)育具有重要意義.
