細胞：JF1細胞
中文名稱：大鼠肉瘤細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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與胚胎干細胞相比，成體干細胞具有許多優(yōu)勢：
胚胎干細胞具有全能性和可以建系傳代等優(yōu)點，理論應用前景廣闊。但實際上由于每個個體的主要組織相容性復合體(MHC)不同，同種異體胚胎干細胞及其分化組織細胞用于臨床會引起免疫排斥，因此基于胚胎干細胞的治療方案要求對患者進行長期免疫抑制劑治療或將患者的造血系統(tǒng)和外來細胞形成嵌合體。
研究證實：人胚胎干細胞能誘導分化成為造血細胞，但小鼠胚胎干細胞的實驗表明：
來源于胚胎干細胞的造血細胞在體內無法重建造血機制，因而限制了臨床應用。為了解決免疫排斥的問題，研究人員探索將患者的體細胞核移植到去核的健康供體卵細胞中，在體外克隆并隨后發(fā)育分化產(chǎn)生攜帶患者自己MHC的胚胎干細胞。
這些胚胎干細胞及其衍生組織移植后不會產(chǎn)生免疫排斥，因此可以用于患者病變組織及其功能的重建，這就是治療性克隆。
但一些研究觀察：胚胎干細胞發(fā)育分化過程中具有極_高的非整倍體發(fā)生率，克隆動物的基因在構成沒有缺陷的情況下，也不能像正常動物基因一樣準確表達出來。
BGC-823細胞 BGC823細胞胃腺癌細胞種屬：人
BV2細胞 膠質細胞種屬:小鼠
CV-1細胞 CV1細胞 腎細胞 種屬：猴
正是這個原因，造成現(xiàn)在98%的動物克隆實驗失敗，而順利降生的克隆動物也經(jīng)常出現(xiàn)體重超重等異常。研究還發(fā)現(xiàn)，利用目前的克隆技術取患者體細胞核的細胞克隆培育出來的新組織一樣會存在缺陷，這項技術還有待完善、成熟。
體細胞克隆所需的卵細胞難以獲得，成體干細胞則可從患者自身獲得，而不存在組織相容性的問題，治療時可避免長期應用免疫抑制劑對患者的傷害。此外，少量的骨髓切除治療有助于形成部分造血嵌合，可使異體成體干細胞的治療成為可能。
