Ar A4 Chemically Competent Cell 農桿菌化學感受態(tài)細胞

產(chǎn)品標簽：

Ar A4；Ar Qual；MSU440；K599；Agrobacterium rhizogenes發(fā)根農桿菌；pCAMBIA2301；Streptomycin 鏈霉素；Rifampicin利福平；

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【好消息】：見我司懋康生物整理的根癌（發(fā)根）農桿菌感受態(tài)細胞技術專題。

產(chǎn)品組分：

產(chǎn)品描述

發(fā)根農桿菌（Agrobacterium rhizogenes）是根瘤菌科農桿屬的一種革蘭氏陰性土壤細菌，能夠侵染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。起關鍵作用的是其攜帶的Ri質粒，含有負責發(fā)根自主性生長和冠癭堿合成的基因。結構上與Ti質粒類似，主要有致毒區(qū)（Vir），T-DNA區(qū)以及冠癭堿合成功能區(qū)等。 

根據(jù)合成冠癭堿的不同，Ri質粒分為4種類型：1）甘露堿型；2）黃瓜堿型；3）農桿堿型；4）米奇矛型。

發(fā)根農桿菌菌株Ar A4含天然農桿堿型Ri質粒，具有廣泛的宿主范圍（玉米，煙草，胡蘿卜、甘草等），同時具有卡那霉素抗性。 

我司（懋康生物）提供的Ar A4化學轉化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，基因型為Agrobacterium rhizogenes (kanR) Ar A4 Ri (agropine type)，經(jīng)pK7WGF2質粒（壯觀霉素抗性）檢測轉化效率>104cfu/μg DNA。

注意事項

7）   Ar A4具有卡那霉素抗性，不可用于具卡那霉素抗性質粒的轉化。

8）   為了保證號的轉化效率，發(fā)根農桿菌的培養(yǎng)務必使用TY培養(yǎng)基（配方見附表1）。

9）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受態(tài)細胞于室溫或手心片刻待其部分融化，達到冰水混合狀態(tài)時插入冰浴中使其*融化。

2)        往100μl感受態(tài)細胞懸液中加入0.01~1μg質粒DNA（轉化效率較高，*次使用前號做預實驗確定所加質粒的量），用手快速、劇烈撥管底混勻或用槍吹吸混勻，依次放于冰中間靜置5min，液氮5min，37℃水浴5min，冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室溫，加入700μl無抗生素的TY液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2h。

4)        6,000rpm離心1min，吸掉600ul上清，之后用槍輕輕吹打重懸菌體。之后加到含相應抗生素的TY平板上，用無菌玻棒輕輕的將細胞均勻涂開。室溫正置10 min，待液體被吸收后，倒置平板，28℃培養(yǎng)2-3天。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質產(chǎn)品。

Ar A4化學感受態(tài)細胞

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