Y2HGold Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌

產(chǎn)品標(biāo)簽

Matchmarker GAL4雙雜交系統(tǒng)；Y2HGold；pGBKT7；Y187；pGADT7；AUR1-C；Aureobasidin A （AbA）；金擔(dān)子素；

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Y2HGold是GAL4系統(tǒng)酵母雙雜交用實(shí)驗(yàn)菌株，能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?；蚺cMATα型酵母菌株Y187通過(guò)接合（mating）操作進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫(kù)篩選和構(gòu)建。Y2HGold-GAL4酵母雙雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用，分別為pGBKT7和pGADT7。前者篩選標(biāo)志為Trp，用于表達(dá)DNA-BD與誘餌蛋白（bait）的融合蛋白；后者篩選標(biāo)志為Leu，用于表達(dá)AD與誘捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y2HGold有四個(gè)報(bào)告基因：AUR1-C，HIS3, ADE2, MEL1，分別由三個(gè)*異源的Gal4反應(yīng)啟動(dòng)元件-G1，G2，M1調(diào)控，這三種啟動(dòng)子只有GAL4識(shí)別的17bp核心區(qū)相同，其余部分都不同。這一特征有效縮減假陽(yáng)性發(fā)生的概率。因?yàn)椋魏握T捕蛋白單獨(dú)結(jié)合引起假陽(yáng)性都需要識(shí)別3個(gè)不同序列，激活4個(gè)報(bào)告基因表達(dá)。另外，新報(bào)告基因AUR1-C與以往的營(yíng)養(yǎng)缺陷報(bào)告基因相比，其篩選抗生素-金擔(dān)子素（Aureobasidin A，AbA）可以有效殺死非抗性克隆，大大降低背景克隆的生長(zhǎng)。具有更低背景，這一優(yōu)勢(shì)也可降低酵母雙雜交假陽(yáng)性發(fā)生的概率。

基因型

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1_UAS^-Gal1_TATA^-His3, GAL2_UAS^- Gal2_TATA^-Ade2 URA3::MEL1_UAS^-Mel1_TATA AUR1-C MEL1

基本信息

培養(yǎng)基：YPDA

培養(yǎng)條件：28℃，YPDA，有氧培養(yǎng)

保存方式：30%甘油，-20℃保存

轉(zhuǎn)化方式：PEG/LiAC；電激；

基本應(yīng)用：酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)

使用說(shuō)明

懋康生物提供的各批次質(zhì)粒菌株發(fā)貨前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的多重驗(yàn)證，如存在質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品三個(gè)月內(nèi)通知我司。收到甘油菌后，請(qǐng)及時(shí)在固體平板上劃線培養(yǎng)，挑取單菌落接種到液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)后使用并保存新的甘油菌。

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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Y2HGold 酵母雙雜交用甘油菌表達(dá)分析

Y2HGold 酵母雙雜交用甘油菌表達(dá)分析