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Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™

Frozen-EZ酵母轉化試劑盒

【溫馨提示】：

見我司懋康生物整理的酵母雙雜交檢測（Yeast two-hybrid assay）產品專題。

基本描述

Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母轉化試劑盒）是一款專門設計用于酵母轉化和文庫篩選的試劑盒，比目前商業(yè)或公開的文獻方法更快捷和更有效。本試劑盒制備的酵母細胞可立即用于轉化或凍存待用（≤ -70°C）。本試劑盒制備的細胞適用于環(huán)形和線性DNAs轉化，同時也能用于其他真菌包括C. albicans，S. pombe和P. pastoris的轉化。

產品亮點：

高轉化效率：每µg質粒DNA（環(huán)形）可產生10⁵ - 10⁶個酵母轉化子；
制備好的感受態(tài)細胞可凍存后待用；
快速簡單步驟于10min內可制備酵母感受態(tài)細胞；
簡單單一步驟，1h內完成轉化；
適用菌株類型廣（S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe, Pichia pastoris）；
簡單方法用于多質粒轉化；

產品組分：本試劑盒可做120個常規(guī)轉化或600個微量轉化實驗。試劑盒4℃一年有效。

組分	規(guī)格	保存
EZ1 Solution	60ml	0-4℃
EZ2 Solution	6ml	0-4℃
EZ3 Solution	60ml	0-4℃

操作流程【見下圖】：

A，感受態(tài)細胞制備

30℃，于10ml YPD肉湯培養(yǎng)酵母菌直至中數(shù)量級（~5 x 10⁶-2 x10⁷cells/ml 或OD₆₀₀= 0.8-1.0）。以下步驟室溫進行。

A1，500 x g離心細胞4min，吸掉上清液；

A2，加入10ml EZ1溶液清洗沉淀。重新離心沉淀細胞，吸掉上清液；

A3，加入1ml EZ2溶液重懸沉淀細胞。

此時獲得的感受態(tài)細胞即可直接用于轉化或凍存?zhèn)溆茫?/span>≤ -70°C）。注意需緩慢凍存細胞，不可使用液氮瞬間凍存細胞。

B，轉化

以下步驟適用于新鮮制備和凍存（室溫融化）的酵母感受態(tài)細胞。

B1，取50µl感受態(tài)細胞與0.2-1µg DNA（體積少于5µl）混合；加入500µl EZ3溶液，*混合；

B2，30°C孵育45min，孵育過程中用手指輕彈或低速渦旋（如果適用于轉化DNA）2-3次讓其混勻；

B3，從上面轉化混合液中取50-150µl到適當平板上，沒有必要沉淀或清洗細胞。、

B4，30°C孵育平板2-4天使得轉化子生長。

訂購信息：Zymo Research原裝正品，現(xiàn)貨供應。咨詢，，：。

貨號	產品名稱	規(guī)格	價格（元）
T2001	Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母轉化試劑盒）	120 Rxns	咨詢

T2001 Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ User Manual

引用文獻：

Plasmids were transformed with high efficiency using the Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ in the construction of synthetic yeast promoters. Researchers showed that decreasing nucleosome affinity correlated with increasing promoter strength and expression levels higher than native species.

Curran KA, et. al. (2014) Design of synthetic yeast promoters via tuning of nucleosome architecture. Nat Commun. 5:4002.

The Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit was used to integrate various TEF1 promoter mutants upstream of a gene in Saccharomyces cerevisiae. Efficient transformation allowed comparison of gene activity and, therefore, determination of promoter strength.

Nevoigt, E., et al. (2006) Engineering of promoter replacement cassettes for fine-tuning of gene expression in Saccharomyces cerevisiae. Appl Environ Microb, 72(8): 5266-5273.

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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