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上海奧陸生物科技有限公司

PA-1人卵巢畸胎瘤細(xì)胞 背景資料

時(shí)間:2017-7-31閱讀:455
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細(xì)胞名稱(chēng)   人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1
形態(tài)特性    上皮樣
生長(zhǎng)特性   貼壁生長(zhǎng)
特征特性    該細(xì)胞是從一名12歲的白人女性卵巢畸胎瘤患者的腹腔積液中分離建立的;該細(xì)胞可以形成緊密的編織狀的克隆,在低血清培養(yǎng)、低密度接種或用5-bromo-2'-deoxyuridine處理時(shí)可以分化為胚狀體。該細(xì)胞表達(dá)胚胎抗原PCC4,但未檢測(cè)到F9的表達(dá)。 
培養(yǎng)條件    MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法    1:4~1:10傳代;每周2~3次。
傳代情況   C5
凍存條件    基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)   培養(yǎng)法(-)
STR    Amelogenin:X;CSF1PO:9,12;D13S317:9,10;D16S539:9,12;D18S51:15,18;D19S433:13;D21S11:29,31.2;D2S1338:24;D3S1358:15;D5S818:11;D7S820:9;D8S1179:14,15;FGA:24;TH01:7,9;TPOX:11;vWA:15,17;
同工酶   
染色體    40~46,XX
使用權(quán)限   A類(lèi)

細(xì)胞規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
細(xì)胞特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為4代以?xún)?nèi)
運(yùn)輸包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞來(lái)源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決!

奧陸生物與您攜手共進(jìn)!

以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)或郵件。
需要特別指出的是:如細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,請(qǐng)于48h內(nèi)及時(shí)反饋,本公司將竭誠(chéng)為您服務(wù)!
一.貼壁細(xì)胞  
客戶(hù)接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%*-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。 
二.懸浮細(xì)胞 
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法  小管內(nèi)也是此細(xì)胞。 
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)。
2. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,用吸管吸出管中細(xì)胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 
4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

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