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大鼠（Rat）腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶免檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式：常先生查看聯(lián)系方式

更新時間：2016-08-15 10:03:14瀏覽次數(shù)：663次

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經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：28條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：常先生 （銷售）

產(chǎn)品簡介

大鼠（Rat）腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子α（TNF-α）呈正相關(guān)。大鼠（Rat）腫瘤壞

詳細(xì)介紹

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

  • 酶標(biāo)儀（450nm）
  • 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  • 37℃恒溫箱

操作注意事項

  1.   大鼠（Rat）腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶免檢測試劑盒試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
  2.   實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
  3.   濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，zui終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
  4.   嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
  5.   所有液體組分使用前充分搖勻。

大鼠（Rat）腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶免檢測試劑盒試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

12孔×8條

12孔×4條

無

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

無

*

6mL

3mL

無

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

無

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

無

底物B

6mL

3mL

無

終止液

6mL

3mL

無

封板膜

2張

2張

無

說明書

1份

1份

無

自封袋

1個

1個

無

注：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、20、40、80、160、320 pg/mL

試劑的準(zhǔn)備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

  1.   手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
  2.   自動洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步驟

  1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
  3.   樣本孔先加待測樣本10μL，再加*40μL；空白孔不加。
  4.   除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.   棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果判斷

 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

 

大鼠（Rat）腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶免檢測試劑盒試劑盒性能

  •  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
  •  靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
  •  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
  •  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
  •  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
  •  有效期：6個月

免責(zé)聲明

  •   大鼠（Rat）腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶免檢測試劑盒試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。
  •   嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。

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