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人抗可提取核抗原抗體elisa試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地鹽城市

聯(lián)系方式:邵大衛(wèi)查看聯(lián)系方式

更新時間:2015-04-14 09:42:15瀏覽次數(shù):115次

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產(chǎn)品簡介

人抗可提取核抗原抗體elisa試劑盒如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品Z高值,請根據(jù)實際情況,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。

詳細介紹

人抗可提取核抗原抗體elisa試劑盒實驗原理: 

用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。 

產(chǎn)品規(guī)格:96T

產(chǎn)品英文:Human anti-extractable nuclear antigen antibody,elisa Kit

產(chǎn)品用途:僅供科研使用

檢測范圍:15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml

特 異 性:本試劑盒可同時檢測重組或天然的,且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)

人抗可提取核抗原抗體elisa試劑盒標本收集:

1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4**后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。

2.血漿:抗凝劑*使用EDTA,標本采集后30分鐘內(nèi)于 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂標本。

3. 其它生物標本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測

4. 標本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。

5.標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20/-80電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,1-6月內(nèi)檢測,4保存的應(yīng)在1周內(nèi)進行檢測。

6. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據(jù)實際情況,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。

溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37和室溫,其次是43和2~8。 
溫育這一步是臨床ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37 30分鐘~1小時,elisa試劑盒則通常為37 1~2小時才能有較*的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關(guān)于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點: 
(1)要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說,加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。 

(2)溫育溫度的選擇。在等elisa試劑盒的說明書中,指出溫育溫度可有兩種,例如,一種是37下1小時,另一種則為43下45分鐘。從免疫測定的抗原抗體反應(yīng)的本質(zhì)來看,在較低的溫度下反應(yīng)較長的時間zui為*。如2~8下反應(yīng)24小時。較高的反應(yīng)溫度,由于分子運動的加憐惜,反應(yīng)時間縮短,這一點對分子含量較多的強陽性樣本的測定沒有問題,但對分子含量少的弱陽性樣本則有漏檢的可能。因此,我們建議在臨床ELISA測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應(yīng)時間的條件。 

關(guān)鍵詞:酶標儀 溫度計
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