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大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒

時(shí)間:2017/11/15閱讀:349
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大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒深圳子科生物提供大量進(jìn)口原裝品牌,分裝穩(wěn)定性強(qiáng)的ELISA系列試劑盒,并自產(chǎn)研發(fā)品牌為ZIEKR的國(guó)產(chǎn)人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,魚ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒,牛羊豬雞ELISA試劑盒等性價(jià)比*。咨詢!

試劑盒組成
    試劑盒組成    96孔配置    保存
1    說(shuō)明書    1份    R.T.
2    封板膜    2片(96)    R.T.
3    密封袋    1個(gè)    R.T.
4    酶標(biāo)包被板    1×96    2-8℃保存
5    標(biāo)準(zhǔn)品    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
6    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
7    酶標(biāo)試劑    6 ml×1瓶    2-8℃保存
8    樣品稀釋液    6 ml×1瓶    2-8℃保存
9    顯色劑A液    6 ml×1瓶    2-8℃保存
10    顯色劑B液    6 ml×1瓶    2-8℃保存
11    終止液    6ml×1瓶    2-8℃保存
12    濃縮洗滌液    (20ml×30倍)×1瓶    2-8℃保存
大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50ul,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50ul,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止:每孔加終止液50ul,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 ,
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請(qǐng)避光保存。
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。        

22035-100 mg    DiIC12(3) perchlorate [1,1‘-Didodecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindocarbocyanine perchlorate]     DiIC12(3)高氯酸鹽    100 mg        3~4周
22036-25 mg    DiIC12(3) triflate [1,1’-Didodecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindocarbocyanine triflate]      DiIC12(3)三氟甲磺酸鹽    25 mg        3~4周
22044-100 mg    DiIC16(3) perchlorate[1,1’-Dihexadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate]      DiIC16(3) 高氯酸鹽    100 mg        3~4周
22052-50 mg    DiIC18(3)-DS [1,1‘-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindocarbocyanine-5,5‘-disulfonic acid]    DiIC18(3)-DS    50 mg        3~4周
22054-50 mg    DiIC18(5)-DS [1,1’-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindodicarbocyanine-5,5’-disulfonic acid]    DiIC18(5)-DS     50 mg        3~4周
22056-100 mg    DiIC1(5)  iodide [1,1‘,3,3,3’,3‘-Hexamethylindodicarbocyanine iodide]     DiIC1(5)碘化物    100 mg        3~4周
22072-25 mg    9-DiI methanesulfonate [1,1’-Dioleyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindocarbocyanine methanesulfonate]        9-DiI 甲磺酸鹽    25 mg        3~4周
22101-100 mg    DiI iodide [1,1‘-Dioctadecyl-3,3,3’,3‘- tetramethylindocarbocyanine iodide]     DiI碘化物    100 mg        現(xiàn)貨
22102-100 mg    DiI perchlorate [1,1’-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate]     DiI高氯酸鹽    100 mg        現(xiàn)貨
22103-100 mg    DiI triflate [1,1‘-Dioctadecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindocarbocyanine triflate]     DiI三氟甲磺酸鹽    100 mg        現(xiàn)貨
22038-100 mg    DiOC2(3) iodide [3,3‘-Diethyloxacarbocyanine iodide]      DiOC2(3)碘化物    100 mg        3~4周
22039-100 mg    DiOC3(3) iodide [3,3-Dipropyloxacarbocyanine iodide]     DiOC3(3)碘化物    100 mg        3~4周
22040-100 mg    DiOC7(3) iodide [3,3’-Diheptyloxacarbocyanine iodide]     DiOC7(3)碘化物    100 mg        3~4周
22042-25 mg    DiOC16(3) perchlorate [3,3‘-Dihexadecyloxacarbocyanine perchlorate]     DiOC16(3)高氯酸鹽    25 mg        3~4周
22045-100 mg    DiOC5(3) iodide [3,3‘-Dipentyloxacarbocyanine iodide]     DiOC5(3)碘化物    100 mg        3~4周
22046-100 mg    DiOC6(3) iodide [3,3’-Dihexyloxacarbocyanine iodide]     DiOC6(3)碘化物    100 mg        3~4周
22060-5 mg    1,1‘-Dioctadecyl-5,5’-diphenyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindocarbocyanine chloride      1,1‘-雙十八醇酯基-5,5’-二苯基-3,3,3',3'-四甲基吲哚碳箐鹽酸鹽    5 mg        3~4周
22066-100 mg    DiO perchlorate [3,3’-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate]      DiO高氯酸鹽     100 mg        3~4周

               

 

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