人角膜蛋白(KERA)ELISA試劑盒深圳子科生物專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)營穩(wěn)定、、、實用的ELISA試劑盒,本公司可以提供ELISA試劑盒免費代測,ELISA試劑盒批發(fā)價零售,深圳子科是ELISA試劑盒專業(yè)生產(chǎn)廠家,并代理各大進口原裝品牌ELISA試劑盒,貨期短,*,原裝!
人角膜蛋白(KERA)ELISA試劑盒操作步驟
1、 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進行。
2、 取出酶標板,按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品,空白對照加入50μl的蒸餾水;
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5、在各孔中加入100μl的酶標記溶液;(不含空白對照孔)
6、將酶標板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時;(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標板洗滌后用吸水紙*拍干;
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔)
10、各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、以O(shè)D值為縱坐標,以標準品的濃度為橫坐標,繪制曲線圖;
3、根據(jù)樣品的OD值查找對應(yīng)的濃度范圍;
標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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