牛血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC) ELISA試劑盒深圳子科生物提供大量品牌進(jìn)口原裝,分裝,以及穩(wěn)定性強(qiáng)的自產(chǎn)國(guó)產(chǎn)人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,魚ELISA試劑盒,植物ELISA試劑盒,牛羊豬雞ELISA試劑盒性價(jià)比*。咨詢!
實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。
牛血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC) ELISA試劑盒操作步驟:
1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品,空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水;
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對(duì)照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對(duì)照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí);(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干;
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對(duì)照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
11.各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);
結(jié)果判斷:
1. 30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
2. 以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),繪制曲線圖;
3. 根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍;
牛血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC) ELISA試劑盒1109-1000 Caspase-4 Fluorometric Substrate, Ac-LEVD-AFC 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1109-200 Caspase-4 Fluorometric Substrate, Ac-LEVD-AFC 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1110-1000 Caspase-4 Colorimetric Substrate, Ac-LEVD-pNA 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1110-200 Caspase-4 Colorimetric Substrate, Ac-LEVD-pNA 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1112-100 Caspase-10 Apoptosis Inhibitor, Z-AEVD-FMK, 2 mM 100 ul BioVision 深圳子科生物
1112-20C Caspase-10 Apoptosis Inhibitor, Z-AEVD-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1113-1000 Caspase-10 Fluorometric Substrate, Ac-AEVD-AFC 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1113-200 Caspase-10 Fluorometric Substrate, Ac-AEVD-AFC 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1114-1000 Caspase-10 Colorimetric Substrate, Ac-AEVD-pNA 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1114-200 Caspase-10 Colorimetric Substrate, Ac-AEVD-pNA 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1115-100 Caspase-13 Apoptosis Inhibitor, Z-LEED-FMK, 2 mM 100 ul BioVision 深圳子科生物
1115-20C Caspase-13 Apoptosis Inhibitor, Z-LEED-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1116-1000 Caspase-13 Fluorometric Substrate, Ac-LEED-AFC 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1116-200 Caspase-13 Fluorometric Substrate, Ac-LEED-AFC 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1117-1000 Caspase-12 Fluorometric Substrate, Ac-ATAD-AFC 1000 Assays BioVision 深圳子科生物
1117-200 Caspase-12 Fluorometric Substrate, Ac-ATAD-AFC 200 Assays BioVision 深圳子科生物
1120-20C Caspase-Familiy Inhibitor, Boc-D-FMK 20 ul BioVision 深圳子科生物
1121-20C Caspase-8 Inhibitor, IETD-FMK (Biotin) 20 ul BioVision 深圳子科生物
1122-100 FMK Negative Control, Z-FA-FMK, 2 mM 100 ul BioVision 深圳子科生物
1122-20C FMK Negative Control, Z-FA-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1123-20C VAD-FMK, 10 mM (Biotin) 20 ul BioVision 深圳子科生物
1124-20C DEVD-FMK, 10 mM (Biotin) 20 ul BioVision 深圳子科生物
1125-20C Calpain Inhibitor, Z-LLT-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1126-20C Cathepsin B&L Inhibitor, Z-Phe-Phe-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1127-20C EMAP-II Inhibitor, Z-ASTD-FMK, 10 mM 20 ul BioVision 深圳子科生物
1128-20C Granzyme B Inhibitor, Z-AAD-CH2Cl 20 ul BioVision 深圳子科生物
1130-5 JC-1 5 mg BioVision 深圳子科生物
1131-1 (Asp)2-Rhodamine 110 (D2R) 1 mg BioVision 深圳子科生物
1134-100 Calpain I (active) (human) 100 ug BioVision 深圳子科生物
1135-100 Cathepsin L (active) (human) 100 ug BioVision 深圳子科生物