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小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)ELISA試劑盒 樣品收集、處理及保存方法： 
1、 血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000

×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 
4、 組織勻漿：將組織加入適量理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。 
5、 保存方法：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)ELISA試劑盒操作注意事項： 
1、 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2、 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3、 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。 
5、 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 
6、 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 
7、加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 

詳細操作步驟如下： 
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL； 
3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。 6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。 結(jié)果判斷：繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)ELISA試劑盒深圳子科免費代測牛胎球蛋白B(FETUB) ELISA試劑盒    
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