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小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a（SDF-1a）ELISA試劑盒試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

實驗原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a（SDF-1a）ELISA試劑盒操作步驟
1、 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進行。
2、 取出酶標板，按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品，空白對照加入50μl的蒸餾水；
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5、在各孔中加入100μl的酶標記溶液；(不含空白對照孔)
6、將酶標板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標板洗滌后用吸水紙*拍干；
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對照孔)
11、各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；

結(jié)果判斷
1、30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值；
2、以O(shè)D值為縱坐標，以標準品的濃度為橫坐標，繪制曲線圖；
3、根據(jù)樣品的OD值查找對應(yīng)的濃度范圍；

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