研究小組近日撤回了一篇關(guān)于microRNA（miRNA）衰減的文章，因為她們發(fā)現(xiàn)，所用的TRIzol試劑會對富含GC的miRNA或具二級結(jié)構(gòu)的miRNA產(chǎn)生不同影響。 研究人員發(fā)現(xiàn)，一旦細胞粘附性喪失，某些miRNA迅速降解。當(dāng)他們以低密度培養(yǎng)細胞或用*或EGTA解離細胞時，細胞內(nèi)成熟miR-141表達水平顯著下降，而來自同一個轉(zhuǎn)錄本（pri-miR-200c~141）的miR-200c不受影響。當(dāng)細胞解離時，*對轉(zhuǎn)錄的阻斷導(dǎo)致miR-141的迅速耗盡，半衰期不到1小時，從而表明miR-141是通過高速衰減而導(dǎo)致表達水平發(fā)生迅速改變的。在進一步的研究中，研究人員通過其他的miRNA包括miR-200a, miR-34a, miR-29b, miR-301a, 和 miR-21再次驗證了這一調(diào)控機制.然而，Narry Kim研究小組近日撤回了該文章。她們在撤回聲明中寫道：“基于我們的結(jié)果，我們認(rèn)為，一些miRNA會根據(jù)細胞的粘附狀態(tài)而選擇性喪失穩(wěn)定性。然而，在后續(xù)研究中，我們發(fā)現(xiàn)，低GC含量的miRNA（如miR-141、miR-29b、miR-21、miR-106b、miR-1和miR-34a）會在樣品制備階段選擇性丟失，而不是在細胞中降解。”

    此外，Kim及她的同事還發(fā)表了新的數(shù)據(jù)，將TRIzol RNA分離方法與另一種不太常用的mirVana方法進行了比較，應(yīng)用在高密度和低密度細胞樣品上。利用TRIzol，她們發(fā)現(xiàn)，低密度培養(yǎng)物中的miR-141水平低于高密度培養(yǎng)物。然而，利用mirVana方法，兩者只有輕微的差異。作者認(rèn)為，兩個操作步驟的數(shù)據(jù)不一致提出了一個嚴(yán)重的問題，即某些miRNA可能在RNA制備過程中丟失，這取決于選擇的操作步驟。 Kim談道：“科學(xué)家不可避免地會承認(rèn)一些假設(shè)，而它們后來被證明是錯誤的。我們也存在一些技術(shù)限制，而在研究的時候未被發(fā)現(xiàn)。因此，得出錯誤的結(jié)論有時是不可避免的。zui重要的是要誠實，一旦我們意識到，就要糾正錯誤。”

    對于miRNA的分離，很多實驗室都是使用TRIzol試劑。但從這篇文章的結(jié)論來看，TRIzol很可能會影響部分實驗結(jié)果。吸取Narry Kim的教訓(xùn)，大家還是采用兩種分離方法，來驗證結(jié)果的可靠性。同時，希望Life Tech的研發(fā)部門好好研究一下，發(fā)布更為可靠的操作步驟。

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