ELISA試劑盒的操作原理：ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

ELISA的操作步驟：樣品收集保存、試劑準備、溫育、洗板、顯色、比色、包被、加樣、加酶標抗體、終止反應、結果判定、 影響因素：

分子量、穩(wěn)定性、純化、包被濃度，抗體純度和產(chǎn)品質(zhì)量盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單，但有可能會影響測定結果的因素卻較多，分布在測定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因，特對常見問題及原因歸納總結于下表。

臨床ELISA測定中可能會出現(xiàn)的問題及可能的原因問題可能的原因（非試劑盒本身的原因）

1．弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出溫育的時間或溫度不夠；顯色反應時間太短；所用配制緩沖液的蒸餾水有問題

2．測定的重復性差（相同樣本兩次測定結果不一致）這是典型的由測定操作引起的問題，包括（1）加樣本及試劑量不準；孔間不一致；（2）加樣過快，孔間發(fā)生污染；（3）加錯樣本；（4）加樣本及試劑時，加在孔壁上部非包被區(qū)；（5）不同批號試劑盒中組分混用；（6）溫育時間、洗板、顯色時間不一致；（7）孔內(nèi)污染雜物；（8）酶標儀濾光片不正確；（9）血清標本未*凝固即加入，反應孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細胞，易出現(xiàn)假陽性反應等。

3．白板（陽性對照不顯色）（1）漏加酶結合物；（2）洗板液配制中出現(xiàn)問題，如量筒不干凈，含酶抑制物（如疊氮鈉）等。（3）漏加顯色劑A或B；（4）終止劑當顯色劑使用。

4．全部板孔均有顯色（1）洗板不干凈；（2）顯色液變質(zhì)；（3）加底物的吸光受酶污染；（4）洗板液受酶等污染。 關鍵參數(shù)和功能幅度，相應的性價關系

對于食品檢測ELISA試劑盒來說，國產(chǎn)的試劑盒在中國市場上比進口的試劑盒占的份額要大，進口的食品檢測ELISA試劑盒主要是在通用性試劑盒上面，國產(chǎn)的PCR試劑盒是在檢測各種天然毒素上面。

一般性食品檢測ELISA試劑盒的操作比較簡單，不需要生產(chǎn)商去上門指導，而且實驗的成功率也大。食品檢測ELISA試劑盒試劑已經(jīng)成熟，穩(wěn)定性好，在食品領域中的應用還在擴大；一般在試劑盒出現(xiàn)問題的試劑，只要提供實驗報告和以及殘留試劑，經(jīng)廠家鑒定確實屬于試劑本身問題的，可以提供退換貨服務。

酶免試劑盒要低溫運輸，（2-8攝氏度），長期保存要在-20攝氏度分裝保存（防止反復凍融影響酶的活性），長期保存做好在2-8攝氏度 。