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用ELISA法檢測(cè)抗體滴度,怎樣包被抗原到96孔板上?。?/h1>
時(shí)間:2014-12-25閱讀:681
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ELISA法檢測(cè)抗體滴度,在設(shè)置好,陽(yáng)性孔,陰性孔的同時(shí),包被好同等濃度的抗原,洗板;然后,將抗體倍比稀釋,例如:在*孔到第十二孔,各加100微升的抗體稀釋液,然后,在*孔加100微升抗體,混勻,抽出100微升加到第二孔,混勻,抽出100微升加到第三孔,混勻,依次一直加到第十二孔,混勻抽出100微升棄之。這樣*到第十二孔中都是100微升的液體;并且依次的抗體稀釋度為1:2,1:4,1:8......1:4096;當(dāng)然,這個(gè)稀釋過(guò)程可以在稀釋板上進(jìn)行。然后按照ELISA步驟,包被抗原,洗板,一抗,洗板,二抗,洗板,顯色,終止,全過(guò)程后。來(lái)判定,你的抗體滴度。其中一抗就是你的待檢抗體。

0.05mol/L pH9.6的碳酸鹽緩沖液稀釋抗原,按照每孔100uL的量加入到酶標(biāo)板上,37度溫育3小時(shí)或者4度過(guò)夜后用洗液洗板,在加入封閉液溫育1小時(shí),zui后拍干.

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