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ELISA試劑盒檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,
操作步驟雖然Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)過程操作點(diǎn)的許多需要掌握操作步驟。
如果稍有不慎,操作不合理的地方,會(huì)造成很多問題,ELISA試劑盒影響了檢測的精度,大大降低了測試質(zhì)量。如花板,假陽性,全彩色,全彩色,顏色空間的低。
這就要求我們在實(shí)驗(yàn)過程做了總結(jié),逐步完善,也就是學(xué)習(xí),分享學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)。以下總結(jié)實(shí)驗(yàn)和解決共同的問題,與你分享。
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