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人白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒操作方法

時間:2014/11/19閱讀:258
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檢測范圍:                                                          96T

0.75pmol/L-20pmol/L

 

使用目的:

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)含量。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)水平。用純化的人白細(xì)胞B27(HLA-B27)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27),再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞B27(HLA-B27)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品(40pmol/L

0.5ml×1

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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