細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢-問(wèn)題分析
就一個(gè)實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō),無(wú)論它運(yùn)作多么好,總會(huì)因?yàn)檎心夹氯恕⒏镄录夹g(shù)或拓展方向而影響原來(lái)的流程,從而產(chǎn)生各種各樣的新問(wèn)題。解決這些問(wèn)題的一個(gè)方法就是確保原先操作規(guī)程不發(fā)生任何變化,即規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs),且不經(jīng)嚴(yán)格*地考證后不輕易改變SOPs。然而,這樣做往往非常困難,特別是針對(duì)科學(xué)研究。科學(xué)本身的生命力就在于不斷變革研究?jī)?nèi)容,拓展研究領(lǐng)域,更新研究方法。
當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢時(shí),先確定實(shí)驗(yàn)室中只有你個(gè)人培養(yǎng)體系有這種問(wèn)題,還是其他研究人員也遇到同樣的問(wèn)題?
如果此問(wèn)題只發(fā)生在你的培養(yǎng)基體系,檢查你所培養(yǎng)的細(xì)胞是否存在污染。檢查你用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基和血清(如是否批次不同或廠商不同)。如果你平常使用的是粉劑或10*儲(chǔ)存液,而現(xiàn)在購(gòu)買的培養(yǎng)基更換為1*液體,而隨后證明問(wèn)題就出現(xiàn)在此,處理方法參見(jiàn)關(guān)于培養(yǎng)基的部分。
如果問(wèn)題與培養(yǎng)基無(wú)關(guān),那么很可能還是細(xì)胞的問(wèn)題。
如果問(wèn)題出在你所培養(yǎng)細(xì)胞的本身,復(fù)蘇另一支凍存的細(xì)胞,并且與正在培養(yǎng)的細(xì)胞加以比較。兩種細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)分開,以免在培養(yǎng)之初就產(chǎn)生污染。隨后做如下檢查:細(xì)胞保藏制度-計(jì)數(shù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞,并繪制生長(zhǎng)曲線,與以前培養(yǎng)該細(xì)胞的資料進(jìn)行比較,檢查是否有下列因素:傳代時(shí)是否接種密度過(guò)低;細(xì)胞傳代是否過(guò)于頻繁;傳代平臺(tái)期是否過(guò)長(zhǎng)。
(來(lái)源: 英 弗雷謝尼 《動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)指南》 細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢 拜力生物編輯整理)